（1）确保用opti-MEM充分清洗细胞。转染时请勿使用含FBS的完全培养基，也不建议用其他无血清培养基 替代opti-MEM，可能因为含其他特定蛋白组分影响转染效果。

（2）确保细胞悬液与转染体系的体积比为1:2。细胞悬液体积偏多会降低转染效率，偏少则影响细胞活性。

（3）配置转染体系时，移液器+涡旋充分混匀是高效转染的关键。转染试剂和核酸、转染液与细胞的不充 分混匀直接影响转染效率。

（1）确保细胞处于对数生长期、无污染的健康状态，细胞活率大于90%，转染前1天可补充新鲜培养基。

（2）如果细胞状态好，可以适当延长转染时间。由于本转染试剂的细胞内吞效率高，通常原代细胞不超过 25 分钟，细胞系不超过45分钟，确保细胞活性和表型保持健康。

（3）使用高质量、高纯度的核酸。mRNA/siRNA选择专业供应商。使用无内毒试剂盒进行DNA提取，并确 保A260/A280值在1.8-2.0之间。核酸降解、纯度不够、含内毒素或其它对细胞有害的物质，会影响转染效率。

适用。贴壁细胞的传统转染方法需遵循“提前铺板→贴壁→转染→孵育过夜→换培养基”等复杂流程，而神州 智递的悬浮转染技术，

操作简单：在消化传代时，用opti-MEM清洗细胞为单细胞悬液，加至转染体系共孵 育～15分钟，即可完成转染。悬浮转染时，细胞与转染试剂接触充分，转染效率高。

对于小体积转染体系（如96孔），离心后细胞沉淀不明显是正常现象。离心管朝同一方向放进离心机，确 保离心后细胞在管壁的同一侧。弃上清时，应避免枪头接触底部，并残留少量液体从而减少细胞损失。

首次尝试时，建议设置阳性对照组（mRNA-GFP/pDNA-GFP），以检测实验操作和试剂的有效性。参考转 染体系推荐表，使用96孔的细胞量即可，节省细胞和试剂。